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        病毒研究用水系列三:如何獲得完美的核酸電泳條帶

        瀏覽次數(shù):2159發(fā)布日期:2020-07-03

        在病毒的分子生物學研究中,電泳技術(shù)是一個重要方法,主要用于核酸、蛋白質(zhì)的分離與鑒定,使用的實驗儀器主要是電泳儀。本文,樂楓純水為大家總結(jié)了實驗中常出現(xiàn)的問題和解決方法。

        <span class='bjFfcClass' style='color:red' >新冠</span>病毒研究儀器用水

        一、什么是核酸電泳?

            核酸電泳是基因操作的核心技術(shù)之一,用于分離、鑒定DNA、RNA 分子混合物和純化DNA的片段。

        二、核酸電泳異常條帶問題 

            核酸電泳實驗中,常常會遇到條帶模糊、拖尾、扭曲等現(xiàn)象,究其原因,除了操作不當,電泳條件未優(yōu)化,電泳緩沖液也是重要的影響因素之一。電泳緩沖液的組成及其離子強度影響DNA的電泳遷移率。

        異常電泳條帶

         

        表1 核酸電泳條帶異常的原因匯總及建議的解決方法

         

        常見問題

        原因

        解決方法

        條帶模糊

        核酸降解

        使用不含核酸酶的超純水配置緩沖液

        電泳緩沖液陳舊

        建議經(jīng)常更換緩沖液

        有蛋白污染

        使用低有機物的超純水配置緩沖液

        核酸變性

        使用超純水或者緩沖液稀釋樣品

        條帶黯淡

        核酸濃度過低

        增加上樣量

        核酸降解 

        使用不含核酸酶的超純水配置緩沖液

        條帶被示蹤染料掩蓋

        避免使用與目的片段遷移率相同的示蹤染料

        拖帶或涂抹帶

        PCR體系或PCR程序不合適

        優(yōu)化PCR體系和PCR程序

        條帶扭曲

        配膠緩沖液和電泳緩沖液不同

        配膠和電泳中使用同一批緩沖液

        電泳時電壓過高

        控制電泳時電壓不超過6V/CM

        三、核酸電泳用純水要求

            為了防止水中雜質(zhì)(如:核酸酶、蛋白質(zhì)、離子等)對電泳結(jié)果的影響,核酸電泳實驗配置緩沖溶液或稀釋樣品需要使用超純水:

        ● 電阻率 18.2 MΩ·cm

        ●TOC < 10 ppb

        ● 無核酸酶

        ● 細菌總數(shù)< 1 CFU/mL

        ● 熱原< 0.005 EU/mL

        ● 0.22 μm 或更低的顆粒過濾

        四、核酸電泳用純水機推薦

            樂楓生物新一代Genie系列智能純水系統(tǒng)是一款專注于解決用戶需求的實驗室純水機。Genie系列智能純水系統(tǒng)采用樂楓的理念——無線連接、“1+N”模式,具有系統(tǒng)智能化、設(shè)計人性化、水質(zhì)標準化三大特色。

        廣州某疾控中心安裝的Genie G

        廣州某疾控中心安裝的Genie G以自來水為進水產(chǎn)EDI純水和超純水

        荷蘭安裝的Genie U

        荷蘭安裝的Genie U以自來水為進水產(chǎn)RO純水和超純水

        穩(wěn)定可靠的水質(zhì)

        • 集合優(yōu)化的流路設(shè)計的 EDI 模塊和樂楓LeFil 和OrganeFil 配方填料的超純化柱,純水和超純水水質(zhì)達到或超過相關(guān)實驗室用水標準;

        • 配備RephiBio 終端過濾器,可有效去除水中的熱原(內(nèi)毒素)、核酸酶、細菌等雜質(zhì),滿足核酸電泳實驗用水要求。

        用戶體驗

        • 觸控屏采用高靈敏度防水屏幕,可帶乳膠手套操作

        • 采用智能IT技術(shù),取水手柄與主機可無線連接,取水點與主機的距離不受電線長度的限制,讓您享受“無線 · 自由”的用水體驗;

        • 遠程取水終端的手柄設(shè)計符合人體工學,升降只手操作;亦可實時查看水質(zhì)信息,完成手動取水或定量取水等操作

            隨著國內(nèi)疫情形勢逐步好轉(zhuǎn),全國各地高校陸續(xù)公布了學生返校復課時間,宅在家中那么久的你,是不是突然變得不安起來?不要慌,超實用的實驗室純水應(yīng)用小技巧“助你成功”! 

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